本发明涉及青藏高原一年生野生大麦基因型XZ16和XZ61及栽培大麦品种Dayton中HvAIR12基因及其用途,属于基因工程技术领域。具体而言,本发明公开了一种大麦HvAIR12基因,该基因的CDS区核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还同时提供了上述野生大麦HvAIR12基因编码的蛋白质,该蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还同时提供了上述野生大麦HvAIR12基因在增强大麦对酸铝耐受性方面的用途;该基因受到酸铝的诱导,沉默后使大麦对酸铝的耐受性显著降低。
本发明公开了一种青藏高原一年生野生大麦HvEXPB7基因,为SEQ ID No1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该青藏高原一年生野生大麦HvEXPB7基因编码的蛋白质,为SEQ ID NO2所示的氨基酸序列。该基因用于调控大麦的根毛的生长,从而增强大麦的耐旱性。该基因能调控青藏高原一年生野生大麦XZ5中根毛的生长,与干旱条件下XZ5的多根毛表型密切相关,对XZ5的耐旱性发挥作用。本发明为培育耐旱大麦品种提供了新的基因资源。
本发明公开了青藏高原野生大麦HsCIPK26基因,其由SEQ ID NO:1的核苷酸序列定义。利用水稻OsCIPK同源基因序列设计电子探针,从已有的各种大麦核苷酸序列库如EST库中搜索同源片段,然后用聚类分析和电子拼接等方法,获取目标基因编码序列(coding sequence,CDS)。提取野生大麦总RNA,制备cDNA和设计PCR引物,通过PCR技术克隆目标基因。对所获得的目标基因进行TA克隆、测序和序列分析。
本发明公开了青藏高原野生大麦HsCIPK5基因,其特征在于,其由SEQ ID NO:1的核苷酸序列定义。本发明利用水稻OsCIPK同源基因序列设计电子探针,从已有的各种大麦核苷酸序列库如EST库中搜索同源片段,然后用聚类分析和电子拼接等方法,获取目标基因编码序列(coding sequence,CDS)。提取野生大麦总RNA,制备cDNA和设计PCR引物,通过PCR技术克隆目标基因。对所获得的目标基因进行TA克隆、测序和序列分析。
本发明公开了青藏高原野生大麦HsCIPK5基因,其特征在于,其由SEQ ID NO:1的核苷酸序列定义。本发明利用水稻OsCIPK同源基因序列设计电子探针,从已有的各种大麦核苷酸序列库如EST库中搜索同源片段,然后用聚类分析和电子拼接等方法,获取目标基因编码序列(coding sequence,CDS)。提取野生大麦总RNA,制备cDNA和设计PCR引物,通过PCR技术克隆目标基因。对所获得的目标基因进行TA克隆、测序和序列分析。
本发明涉及植物功能基因组学;具体地说,涉及分离、克隆大麦HvHKT1基因编码序列(coding sequence)后,将其与花椰菜花叶病毒启动子(CaMV35S)连接,然后转化拟南芥,并对转基因拟南芥和野生型拟南芥进行耐盐性评价即,本发明公开了大麦HvHKT1基因的用途:用于构建转基因植株,所述转基因植株的耐盐性得以提高;所述大麦HvHKT1基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。
本发明公开了HvGH43基因在调控大麦籽粒β‑葡聚糖含量中的应用。该HvGH43基因的开放阅读框的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述调控的方式为通过敲除HvGH43基因,提高大麦籽粒的β‑葡聚糖含量。本发明通过CRISPR/Cas9技术敲除大麦1H染色体上的HvGH43基因,得到的纯合突变体株系的籽粒中β‑葡聚糖含量显著或极显著上升,最高可在野生型基础上提高29.2%。
本发明公开了HvBGlu3基因在调控大麦籽粒β‑葡聚糖含量中的应用,该HvBGlu3基因的开放阅读框的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;调控的方式为通过沉默HvBGlu3基因,提高大麦籽粒的β‑葡聚糖含量本发明通过CRISPR/Cas9技术敲除大麦3H染色体上的HvBGlu3基因,得到的三种纯合突变体株系的籽粒中β‑葡聚糖含量均显著或极显著上升,分别可在野生型基础上提高5.56%,7.69%和9.44%